如何快速了解光度法的工作原理？

仪器的结构及工作原理

朗伯-比尔定律

当一束平行单色光通过任何均匀、非散射的固体、液体或气体介质时，一部分被介质吸收，一部分透射出介质，一部分被器皿的表面反射。

在吸光光度的分析中，通常将待测物溶液和空白溶液分别置于同样质料及厚度的吸收池中，此时反射光强度基本上是不变的，其影响可以忽略。

双波长测试法

根据朗伯-比尔定律，物质的浓度不同，对光谱的吸收也会不同。将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时，便可得到不同波长相对应的吸收强度。如以波长（λ）为横坐标，吸收强度（A）为纵坐标，就可绘出该物质的吸收光谱曲线。利用该曲线进行物质定性、定量分析的方法，称为分光光度法。为了扣除环境和杂质吸收的干扰，采用同一时间测量两个特征光谱，然后相减的方法，即双波长测试法来扣除环境的干扰。仪器用主波长测量出吸光度 A1，同时用副波长测量出吸光度 A2，差值 AC=A1-A2作为待测物溶液的吸光度，用来计算待测物含量。双波长测试法能有效去除样本混浊的干扰，有效抵消光源的波动和电路的噪声。在波长的选择时，应选择干扰因数对主副波长的吸光度影响尽可能接近的两个波长。

仪器的结构及工作原理

多参数水质检测仪以微系统研究中心自主研发的可见光微型光谱仪为核心，基于现代光谱分析技术，完成氨氮、阴离子表面活性剂、Cr6+、COD、Pb2+、总酚、总磷 7 个水质参数的实时在线检测。多参数水质检测仪主要由光学系统、流路系统、多功能样品检测室、控制系统和嵌入式系统五部分组成。光学系统为吸光度的检测提供光路及吸收光谱的检测，流路系统由微型流控器件组成，多功能样品检测室集成了超声清洗以及帕尔贴恒温的结构，控制系统实现各功能模块按照检测需要有序工作，嵌入式接收光谱仪传送的检测数据，完成数据的处理与检测结果的显示。

仪器具有八条独立检测流路和独立检测光路，多位阀的 26 个通道经过分配每一路进一种试剂或标准液，一号管作为公共流路。溶液通过多位阀的选择，在微型蠕动泵的驱动下，进入样品室，经过超声或者气泡搅拌加快反应，卤灯发出的光线透过样品室内的液体被光谱仪接收，光谱仪通过串口将吸光度数据传输嵌入式系统中，嵌入式系统通过待测液吸光度与吸光度-浓度标准曲线的对比，终确定液体内某一物质的浓度，从而实现对水质参数的快速实时监测。

样品的重复性测试需要保证每次测试的试剂量相同、温度环境相同、仪器*清洗干净、搅拌的力度及时间必需相同且使化学反应充分。为了实现稳定、准确的测量，根据样品反应所需的恒温、进样、多试剂切换、系统清洗、搅拌等前处理要求，来完成测控系统的设计。